不同情況下如何清洗層析柱
發布時間: 2023-12-19 點擊次數: 1600次
層析柱是一種用于分離、純化和分析樣品的實驗室設備,通過根據樣品組分的親和性差異,在填充物上進行相互作用和分離。清洗層析柱是保持其性能和延長壽命的重要步驟。
以下是一般情況下清洗層析柱的步驟:
1.溶劑預洗:首先,通過使用一種與待測樣品不相容的溶劑進行預洗。例如,如果使用有機溶劑進行柱層析,則可以選擇用純水或其他無機溶劑進行預洗。這有助于去除殘留在柱內的雜質。
2.淋洗:接下來,使用適當的淋洗溶劑進行柱層析。淋洗溶劑通常是色譜法中使用的溶劑,并根據柱的類型和分離模式進行選擇。將淋洗溶劑以適量的流速通過柱心,通常為柱容積的1-2倍。這有助于沖洗柱內的樣品殘留物和溶劑中的離子,以準備下一次分析。
3.溫和清洗:對于較為粘附的樣品,可以使用溫和的清洗條件。例如,可以使用配制的清洗溶液(如酸性、堿性或有機溶劑)進行柱洗脫。根據樣品和柱填料的特性,選擇適當的酸性或堿性條件,并調整濃度和pH值。
4.高強度清洗:對于難以去除的殘留物,可以嘗試使用高強度的清洗劑。例如,在某些情況下,可以使用有機溶劑混合酸或有機溶劑混合堿來清洗。但是,使用高強度清洗劑要小心,以避免對柱填料造成損傷。
5.淋洗:最后,用純溶劑(如純水或其他無機溶劑)進行最后的淋洗,以確保將所有清洗劑沖洗掉。